Determinación de subtipos del virus respiratorio sincicial en muestras positivas por el virus, aisladas en el Hospital Nacional de Niños / Detection of human respiratory syncytial virus subtypes A and B in hospitalized children in Costa Rica

Objetivo: El virus respiratorio sincicial, VRS, es un pneumovirus de la familia Paramyxovridae, que causa enfermedad severa del tracto respitaroio inferior en neonatos y niños pequeños, especialmente en los primeros años de vida. Es responsable de constantes hospitalizaciones y visitas a los servicios de emergencias. Se han identificado dos subtipos: VRS-A y VRS-B, mediante anticuerpos monoclonales y técnicas moleculares. El objetivo de este estudio fue establecer por primera vez la circulación de ambos subtipos del VRS, en muestras positivas de niños hospitalizados durante el pico estacional de 2008, en el Hospital Nacional de Niños, HNN. Métodos: Se analizaron 49 muestras de aspirados nasofaríngeos de niños hospitalizados, de un total de 578, de las cuales 197 fueron previamente positivas para VRS por inmunofluorescencia directa. Se realizó cultivo celular, y un RT-PCR múltiple, estandarizado en el laboratorio, para detectar VRS-A y VRS-B. Resultados: La frecuencia del VRS fue del 34 por ciento en el HNN, para agosto y septiembre de 2008. De las 49 muestras analizadas por RT-PCR, 41, 84 por ciento, fueron positivas, 34, 83 por ciento, por el subtipo A y 7, 17 por ciento, por el B; 8 fueron negativas. Ningún paciente presentó infección mixta y no hubo diferencia entre los síntomas, la edad o el origen geográfico de los niños. El cultivo fue positivo solo en el 30 por ciento de las muestras. Conclusión: La frecuencia del VRS para el periodo en estudio fue del 34 por ciento de las muestras analizadas en aspirados nasofaríngeos. Este es el primer reporte de la detección de los subtipos A y B del VRS, en una pequeña cohorte del HNN, confirmados por un RT-PCR múltiple estandarizado en el laboratorio.

Development of a Lepto-IgM EIACR test to diagnose leptospirosis disease in Costa Rican patient samples

Leptospirosis es una enfermedad febril endémica en Costa Rica que puede ser mal diagnosticada, ya que sus manifestaciones varían desde síntomas similares a gripe, hasta enfermedades severas que afectan órganos vitales como el riñón, hígado o pulmón. Por ello es importante un diagnóstico específico y temprano. El propósito de este estudio fue desarrollar un ELISA anti-IgM (Lepto-IgM EIACR) y compararlo con Lepto-Dipstick IgM (Lepto-DS IgM) y PanBio-EIA IgM utilizando como prueba de referencia la Microaglutinación MAT. Se usó el suero de 736 donadores de sangre como control negativo para determinar la especificidad del ensayo (97,1 po rciento, CI (96-98). Pruebas de reacción cruzada fueron analizadas en 268 muestras de pacientes distribuidos en 6 enfermedades. Dengue y Sarampión mostraron los valores más altos de reactividad (16 por ciento) y Rubeola el más bajo (3 por ciento). La sensibilidad de Lepto- IgM EIACR fue 90,9 por ciento (CI (81-100), mientras que Lepto-DS IgM alcanz¢ un 48,5 porciento (CI (31-66), la cual se calculó a partir de 33 sueros pareados de 96, que fueron enviados para el diagnóstico de Leptospira sp. Las serovariedades más prevalentes detectadas por MAT en estas muestras fueron: Hebdomadis 14,7 por ciento, Hardjo 11,8 por ciento, Pomona 8,8 por ciento e Icterohaemorrhagiae 5,9 por ciento. Adicionalmente, de 59 muestras agudas de pacientes febriles que fueron inicialmente analizadas por PanBio-EIA IgM, 21 resultaron positivas, de éstas, Lepto-IgM EIACR y Lepto-DS IgM, detectaron el 80,9 por ciento y 33,3 por ciento respectivamente. Los resultados de la evaluación indican que Lepto-IgM EIACR podría ser una buena alternativa para detectar leptospirosis aguda en Costa Rica.

Patrones indeterminados de Western Blot en sueros reactivos por anticuerpos contra los virus linfotrópicos de células T tipo I/II, HTLV I/II, en donantes de sangre en Costa Rica / Western Blot indeterminate patterns in reactive serum by antibodies against T lynphotropic virus I/II, HTLV I/II, in blood donors in Costa Rica

Los virus linfotrópicos humanos tipo I y II, HTLV I/II, son retrovirus asociados a diferentes patologías. El HTLV I fue el primer retrovirus relacionado con enfermedad y ocasiona principalmente dos tipos de patologías: la leucemia o linfoma de células T del adulto, LTA, y la paraparesia espástica tropical, PET. El HTLV-II se ha asociado a cuadros neurológicos similares. Centroamérica, América del Sur y el Caribe se definen como áreas de alta prevalencia. Para prevenir la transmisión de la infección de estos retrovirus, se ha implementado el tamizaje de la donación sanguínea en muchos países, incluido Costa Rica. En donadores tamizados la técnica de Western Blot, WB, ha demostrado una actividad incompleta de anticuerpos contra los antígenos virales. Estos patrones se definen como indeterminados. Entre diciembre del 2002 y marzo del 2006 se reportaron los siguientes resultados de WB al evaluar sueros reactivos por ensayo inmunoenzimático: 39 (0,02 por ciento) donantes positivos, 254 (0,14 por ciento) indeterminados y 113 (0,06 por ciento) negativos. Se seleccionaron 42 muestras indeterminadas y 25 positivas para ser analizadas por un sistema comercial (HTLV I/II Blot 2.4); las positivas se clasificaron como: 15 HTLV I, 8 HTLV II y dos muestras indeterminadas. Del grupo de indeterminados se presentaron 4 resultados no concordantes: 1 HTLV II, 1 HTLV y 2 negativos. Se demostró que, en muestras nacionales, patrones positivos débiles pueden estar relacionados a WB indeterminados o a reactividad parcial de infección por HTLV II...

Human T lymphotropic virus type I and II (HTLV I/II) are retroviruses associated with different clinical manifestations. HTLV I was the first retrovirus associated to human disease, and it is the etiological agent of two main pathologies: adult`s T-cell leukemia (ATL) and myelopathy/tropical spastic paraparesis (HAM/TSP). HTLV-II has been related to similar neurological disorders. Central America, South America and the Caribbean are areas of high prevalence.In many countries, including Costa Rica, blood screening has been implemented to prevent retroviral blood transmission. Applying the Western Blot (WB) technique, screening for HTLV I/II in blood donors has shown...

Detección de anticuerpos contra los virus linfotrópicos de células T Tipo I, II, HTLV I, II, como medida de seguridad sanguínea en donantes de sangre en Costa Rica, mayo del 2002 a diciembre del 2004 / Detection of antibodies against viruses linfotropicos T cell type I, II, HTLV I, II, as a security measure blood in blood donors in Costa Rica, May 2002 December 2004

Los Virus Linfotrópicos Humanos tipo I y II, HTLV I, II, fueron los primeros retrovirus descritos y aislados en 1980. Tienen distribución mundial y son endémicos en el sur de Japón, el Caribe, algunos países del Sur y Centro América, Africa occidental y algunas otras poblaciones. Aunque la mayoría de infectados permanecen asintomáticos por largos períodos, el HTLV I es el agente causal de la leucemia linfoma de células T del adulto, LTA, y de la Paraparesia Espástica Tropical, PET o mielopatía asociada, MAH. El HTLV II se identificó inicialmente en un paciente con leucemia peluda de células T, pero se requieren más estudios para establecer la relación entre ambos. Dos de las principales vías de transmisión son la transfusión sanguínea o por compartir agujas de individuos infectados en drogadicción. Para controlar la transmisión de la infección en Costa Rica, se inició en el año 2002 un proyecto de la Sección de Laboratorios Clínicos de la CCSS, para la tamización de anticuerpos contra estos retrovirus a todos los donantes de sangre, fecha histórica para nuestro país por ser el primero en tener una cobertura del 100 por ciento de los donantes en América Latina...

During 1980, Human T lymphotropic virus (HTLV-I /II) were the first retrovirus identified and isolated.The geographic distribution of the virus is global, with endemic regions like south Japan, the Caribbean islands, western Africa, some South and Central America countries and other specific populations.Most infected patients remain without symptoms for long periods of time but association with human disease has been demonstrated. HTLV-II has been linked to adult T-cell leukemia/lymphoma (ATL/ATLL) and is also the causative agent of a neurological disorder termed HTLV-II associated Myelopathy/ttropical Spastic Parapesis.HTLV-II was first identified in a patient with hairy-cell leukemia, however better studies are needed to establish the relation between both. HTLV can be transmitted by blood transfusion and sharing of needles and syringes. During 2002, Costa Rica became the first Latin American country with 100% coverage of blood donors. In this year, the Sección de Laboratorios Clínicos de la CCSS began as a project the screening for antibodies against HTLV in order to avoid transmission through this route. Of 106958 blood donors, 582 (0,54%) were initially reactive by enzyme-immunolinked assay (EELISA), 272 (46,7%) were reactive in duplicated with the same ELISA and they were analyzed by a second ELISA and 232 were confirmed with an "in-house "Western Blot (WB).. Those represent the 0.25% of the initial population. Twenty seven samples (0.03%) confirmed positives and 136 (0.13%) were indeterminate. A commercial WB was performed with 13 of these positive samples, 7 were HTLV-II, 5 were HTLV-III and 1 was an indeterminate pattern...

Infección por Chlamydia Trachomatis en un grupo de mujeres de alto riesgo, trabajadoras del sexo en Costa Rica / Infection by Chlamydia Trachomatis in a group of women of high risk, workers of sex in Costa Rica

Las clamidias son los patógenos más importantes en las enfermedades de transmisión sexual en todo el mundo. Sólo para Estados Unidos se estima que ocurren más de 4 millones de infecciones clamidiales por año. En Costa Rica pocos estudios de la infección por Chlamydia trachomatis (CT) han sido publicados por la falta de introducción de pruebas sensibles y específicas para su tamizaje y diagnóstico. Este estudio pretende determinar la presencia de la infección por CT en un grupo de mujeres trabajadoras de sexo (MTS) para demostrar la necesidad de diagnóstico y tomar las medidas adecuadas de prevención y control. En un estudio descriptivo transversal prospectivo, un total de 457 MTS fueron analizadas, se obtuvieron muestras de endocervical y orina, así como datos epidemiológicos. La prueba de PCR Roche Diagnostic fue usada para detectar la infección por C. Trachomatis. Se determina un 14.7 por ciento de prevalencia de infección afectando principalmente a los grupos etarios de 16 a 34 años así, como su relación con comportamientos de riesgo tales como, edad temprana de inicio de relaciones sexuales (10 a 19 años), baja escolaridad (66 por ciento primaria o menos), múltiples compañeros sexuales (50.7 por ciento de 11 a 50 por semana), no uso del preservativo (43.8 por ciento). No se encontró relación entre la infección por CT y el diagnóstico clínico sintomatológico lo que evidencia la necesidad de la implementación de un método de diagnóstico como las pruebas de amplificación nucleica de gran sensibilidad y especificidad como, su aplicación en diferentes tipos de muestras: endocervicales, uretrales, orina que permitan la detección y prevención de la infección, para brindar los tratamientos oportunos y la disminución de la morbilidad y la transmisión.

The Chlamydia are the most important pathogens in the sexual transmission diseases over the world. An estimated of 4 million Chlamydia infection occurs annually in the United States. In Costa Rica, few studies of the Chlamydia trachomatis (CT) infection have been published because of the lack of sensitive and specific testing introduction methods for screening and diagnostic. This study tries to determine the presence of the infection by CT in a group of women sex workers (WSW) to demonstrate that we must implemented the diagnostic and take the measures from prevention and control. In one descriptive, prospective and transversal study, a total of 457 WSW were analyzed. Endocervicales, urine samples and epidemiological data were obtained from the study. C. Trachomatis infection was detected with the PCR Roche Diagnostic Test. In this study a 14.7% of prevalence is determined, affecting mainly groups of people from 16 to 34 years old. Besides, a connection with early sexual intercourse (10 to 19 years), low schooling (primary 66% or less), multiple sexual partners (50.7% from 11 to 50 per week), non use of condom (43.8%) was found. In the study there was not relation between infection by CT and the clinical diagnostic symptoms that demonstrates the necessity of the implementation of a diagnostic method, like nucleic acid amplifi cation tests, for the great sensitivity and specifi city, and its application in different specimens: urethral, endocervicales, urine that allow the detection and prevention of the infection, to offer the proper treatments and the reduction of the morbidity and the transmission.

Prevalencia de anticuerpos contra el trypanosoma cruzi en donantes de sangre de la seguridad social Costa Rica, setiembre 2003 - setiembre 2004 / Prevalence of antibodies against trypanosoma cruzi in donors of blood of the social security Costa Rical, September 2003 - September 2004

La enfermedad de Chagas es una infección ocasionada por el Trypanosoma cruzi, parásito responsable de 16 a 18 millones de personas infectadas en América Latina de las cuales 50.000 mueren cada año. Una de las principales fuentes de transmisión es por transfusión sanguínea. A partir de setiembre del 2003 en los Bancos de Sangre de la C.C.S.S. se implementó la tamización del 100 por ciento de los donantes de todo el territorio nacional. Cincuenta y tres mil trescientos treinta y siete muestras de suero, fueron recolectadas de setiembre del 2003 a setiembre del 2004 y analizados por EIA con tres diferentes fuentes antigénicas (proteínas recombinantes, péptidos homólogos y lisado proteíco de la Cepa Brenner para el WB). De las muestras analizadas, 305 (0,6 por ciento) fueron inicialmente reactivas. De éstas, 176 (58 por ciento) resultaron repetidamente reactivas (RR) por el EIA-ICMRT de tamizaje. De las RR 122 (69 por ciento) mostraron resultados discrepantes entre los dos EIA realizados, 42 (24 por ciento) fueron positivos por los dos ensayos y 12 (7 por ciento) no pudieron ser evaluadas. De las muestras RR por el EIA-ICMRT 39 (22 por ciento) resultaron positivas por WB, 65 (37 por ciento) fueron indeterminadas y 56 (32 por ciento) negativas, 15 muestras quedaron pendientes. En el estudio se obtuvo 0,6 por ciento de reactividad inicial, ligeramente mayor a lo reportado en los últimos tres años en el país. La prevalencia obtenida fue 0.08 por ciento el porcentaje más bajo del área Centroamericana. Al comparar los resultados obtenidos en el EIA-ICMRT y el WB, se observa una mayor correlación entre las muestras con DO altas >2,0 y un resultado positivo por WB según el criterio establecido. En general las reacciones negativas o indeterminadas por WB se presentaron en muestras con DO<2,0 y contra proteínas de pesos moleculares bajos (15-50kD). El estudio demuestra la importancia de realizar varias pruebas diagnósticas de alta sensibilidad y especificidad...

The Chagas' disease is a infection caused by Trypanosoma cruzi parasite; it is responsible of infestation of 16 to 18 people in Latin America with 50,000 deaths every year. The main source of transmission is for blood transfusion. Since September 2003, Caja Costarricense de Seguro Social’s Blood Banks have implemented the screen in about 100% of donors of the country. The 53307 serum samples were collected in the period of September 2003 to September 2004, and they were tested with the EIA with three types of antigenic sources (recombinant protein, homolog peptides, protein lysate of Strain Brenner for WB). Of the tested samples, 305 (0.6%) were beginning reactives. Of these, 176 (58%) were repeat reactives (RR) for the test EIA-ICMRT. Of the RR, 122 (69%) shown discrepancy between two EIA tested, 42 (24%) were positives for the two assays and 12 (7%) did not have be evaluated. The RR samples tested for EIA-ICMRT, 39 (22%) were positives for WB, 65 (37%) were indetermined, 56 (32%) were negatives, and 15 samples stayed pending. The results of the study got 0.6% of initial positive test; it was a light increment with respect to results of the 3 years in the country. The prevalence was 0.08%, It is the lowest in Central America. Comparing the results between EIA-ICMRT and WB, it was a bigger correlation between the samples with DO highs >2, 0 and a positive result for WB according the established criterion. In general, the negative or indeterminate results for WB correspond to samples with DO<2, 0 and against proteins with low molecular weights (15-50 kD). The study shown the importance to do certain diagnostic assays of high sensibility and specificity for determine the real prevalence and for the control of transmission of infection with the proposal of offer blood banks to costarican people and rational use of them.

Prevalencia de anticuerpos Anti Chagas y Anti HTLV-1 en un grupo de donantes del Banco de Sangre del Hospital Nacional de Niños, en 1994 / Prevalence of antibodies of anti Chagas and anti HTLV-1 in the donors group of blood bank of Hospital Nacional de Niños, in 1994

Se realizó el presente estudio para establecer la seroprevalencia de anticuerpos, en donantes de sangre, contra los patógenos Trypanosoma cruzi y el virus linfotrópico T humano 1, que no se tamizan de forma rutinaria en los bancos de sangre de Costa Rica. Se buscaron anticuerpos IgG contra Trypanosoma cruzi por un método de RIA, desarrollado en el ICMRT, y basado en el principio de la detección de anticuerpos específicos, obteniéndose 14 positivos en 1.000 muestras de suero. Como prueba confirmatoria se realizó un Western Blot, usando un T. cruzi procesado en Honduras y otro de Costa Rica, mostrando un 0,4 por ciento de positividad y un 0,5 por ciento de indeterminados. Se muestra patrón de bandas obtenido para las muestras positivas. Se tamizaron 662 sueros de donadores en busca de anticuerpos contra HTLV-1 por medio de un método de aglutinación pasiva de partículas de gel sensibilizadas, obteniéndose 9 aglutinaciones dudosas, que se verifican por Western Blot y que dieron 0,3 por ciento indeterminado por presencia de la banda P21. Se discute la importancia de realizar estas determinaciones de rutina en los bancos de sangre nacionales.

Respuesta inmune humoral contra la vacuna del virus de hepatitis B H-B-Vax en el personal hospitalario / Immuno-Humoral response to Hepatitis B H-B-Vax vaccine in health care workers

Se hizo un estudio con 201 individuos sanos, trabajadores en el campo de la salud, para evaluar un programa de vacunación por hepatitis B en un hospital metropolitano. Para evaluar el contacto previo con el virus se hizo en forma concomitante a la primera dosis un examen serológico, encontrando una prevalencia de 12,4 por ciento de hepatitis B. De los 176 seronegativos, 68 completaron el esquema de tres dosis, a los 0,1 y 4 ó 6 meses. Un control efectuado a los 7 meses de la administración de la primera dosis reveló que 88,2 por ciento tenía niveles protectores (>10 mlU/ml) de anti-HBs, algunos alcanzando hasta 19.000 mlU/ml. A los tres años se controlan 11 que quedaron con el esquema incompleto (1 ó 2 dosis), y 9 de ellos presentaron niveles de 50 a 1041 mlU/ml, proporcional al número de dosis recibidas. Se reveló una respuesta protectora adecuada con el esquema de tres dosis, aunque 11,8 por ciento de los vacunados no respondieron. Se recomienda la administración de la vacuna a todo personal hospitalario con el esquema de tres dosis

Respuesta inmunehumoral contra la vacuna del virus de hepatitis B H-B-VAX en el personal hospitalario / Inmunehumoral response againt hepatitis B vaccines H-B-VAX in the hospital personnel

Se hizo un estudio con 201 individuos sanos, trabajadores en el campo de la salud, para evaluar un programa de vacunación por hepatitis B en un hospital metropolitano. Para evaluar el contacto previo con el virus se hizo en forma concomitante a la primera dosis un examen serológico, encontrando una prevalencia de 12,4 por ciento de hepatitis B. De los 176 seronegativos, 68 complementaron el esquema de tres dosis, a los 0,1 y 4 ó 6 meses. Un control efectuado a los 7 meses de la administración de la primera dosis reveló que 88, 2 por ciento tenía niveles protectores (>10 mlU/ml) de anti-HBs, algunos alcanzando hasta 19.000 mlU/ml. A los tres años se controlaron 11 que quedaron con el esquema incompleto (1 ó 2 dosis), y 9 de ellos presentaron niveles de 50 a 1041 mlU/ml, proporcional al número de dosis recibidas. Se reveló una respuesta protectora adecuada con el esquema de tres dosis, aunque 11, 8 por ciento de los vacunados no respondieron. Se recomienda la administración de la vacuna a todo personal hospitalario con el esquema de tres dosis (Rev. Cost. Cienc. Méd. 1988; 9(4): 41-7)